微生物培养基

时间:2024-08-29 02:26:39编辑:流行君

培养基制备的基本过程是什么?

培养基制备的基本过程如下:(1)调配成分按培养基组成准确称取各成分用量,加一定量蒸馏水使其充分混合:(2)溶解将调配好的混合物经沸水浴使其完全溶解。(3)将pH调至适宜值,一般是7.2~7.6。(4)滤过澄清自配的培养基通常有一些混浊或沉淀,需滤过澄清后方可使用。(5)分装按制备目的将培养基分装于不同的容器内,如试管、三角瓶等。(6)灭菌根据培养基成分的性质,选择合适的温度及方法进行灭菌。由耐热物质配制成的培养基常以103.43kPa灭菌15~20分钟;含糖培养基以68.95kPa灭菌lO~15分钟;富含蛋白质的培养基需用血清凝固器灭菌。(7)质量检验培养基制备后需进行无菌试验和效果试验以检查是否合格。(8)保存制备好的培养基应注明名称、制作日期,存放在冷暗处或4℃冰箱里。

制作培养基的步骤

1、配料:在容器中加入少量水,按照配方称取各种药品,加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。2、溶解:淀粉溶解:少量冷水调成糊状,加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95-97℃ ,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。3、调PH:用1N的盐酸或1N的 NaOH把培养基调节到所要求的值。4、过滤:滤纸或棉花进行过滤。5、分装:一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。(1)三角瓶若作静置培养,则100ml培养基/250ml的三角瓶,最多不能超过150ml培养基/250ml的三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15-20ml培养基/250ml的三角瓶,保证通气良好。(2)试管分装液体培养基一般装4-5ml,约试管的1/4高度。固体斜面培养基一般装3-4ml,约试管的1/5高度。6、包扎:分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。7、灭菌:按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。8、摆斜面:灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放,使其凝固成为一个斜面,约占试管长度的1/2。9、贮存:培养基在30℃下放置一天,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。

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